Kuenea kwa matumizi ya viuatilifu sintetiki kumesababisha matatizo mengi yakiwemo kuibuka kwa viumbe sugu, uharibifu wa mazingira na madhara kwa afya ya binadamu.Kwa hiyo, dawa mpya za kuua wadudu ambazo ni salama kwa afya ya binadamu na mazingira zinahitajika haraka.Katika utafiti huu, biosurfactant ya rhamnolipid iliyotengenezwa na Enterobacter cloacae SJ2 ilitumiwa kutathmini sumu kwa mbu (Culex quinquefasciatus) na mabuu ya mchwa (Odontotermes obesus).Matokeo yalionyesha kuwa kulikuwa na kiwango cha vifo vinavyotegemea kipimo kati ya matibabu.Thamani ya LC50 (50% ya ukolezi hatari) kwa saa 48 kwa viuasusiasuaji vya mabuu ya mchwa na mbu ilibainishwa kwa kutumia mbinu ya kuweka curve isiyo ya mstari.Matokeo yalionyesha kuwa maadili ya LC50 ya saa 48 (muda wa kujiamini 95%) ya shughuli ya larvicidal na antitermite ya biosurfactant ilikuwa 26.49 mg/L (kiwango cha 25.40 hadi 27.57) na 33.43 mg/L (kiwango cha 31.09 hadi 35.68) mtawaliwa.Kulingana na uchunguzi wa histopathological, matibabu na biosurfactants yalisababisha uharibifu mkubwa kwa tishu za organelle za mabuu na mchwa.Matokeo ya utafiti huu yanaonyesha kwamba biosurfactant ya microbial inayozalishwa na Enterobacter cloacae SJ2 ni zana bora na yenye ufanisi kwa udhibiti wa Cx.quinquefasciatus na O. obesus.
Nchi za kitropiki hupata idadi kubwa ya magonjwa yanayoenezwa na mbu1.Umuhimu wa magonjwa yanayoenezwa na mbu umeenea.Zaidi ya watu 400,000 hufa kutokana na malaria kila mwaka, na baadhi ya miji mikubwa inakabiliwa na milipuko ya magonjwa hatari kama dengue, homa ya manjano, chikungunya na Zika. kesi muhimu3,4.Culex, Anopheles na Aedes ni jenasi tatu za mbu zinazohusishwa zaidi na maambukizi ya magonjwa5.Kuenea kwa homa ya dengue, maambukizi yanayoenezwa na mbu aina ya Aedes aegypti, yameongezeka katika muongo mmoja uliopita na kuwa tishio kubwa kwa afya ya umma4,7,8.Kulingana na Shirika la Afya Duniani (WHO), zaidi ya 40% ya watu duniani wako katika hatari ya homa ya dengue, huku wagonjwa wapya milioni 50-100 wakitokea kila mwaka katika zaidi ya nchi 1009,10,11.Homa ya dengue imekuwa tatizo kubwa la afya ya umma kwani matukio yake yameongezeka duniani kote12,13,14.Anopheles gambiae, anayejulikana kama mbu wa Kiafrika wa Anopheles, ndiye msambazaji muhimu zaidi wa malaria ya binadamu katika maeneo ya tropiki na tropiki15.Virusi vya Nile Magharibi, encephalitis ya St.Aidha, wao pia ni wabebaji wa magonjwa ya bakteria na vimelea16.Kuna zaidi ya spishi 3,000 za mchwa ulimwenguni, na wamekuwepo kwa zaidi ya miaka milioni 15017.Wadudu wengi huishi kwenye udongo na hula kwa kuni na bidhaa za mbao zilizo na selulosi.Mchwa wa Kihindi Odontotermes obesus ni mdudu muhimu anayesababisha uharibifu mkubwa kwa mazao muhimu na miti ya mashamba18.Katika maeneo ya kilimo, mashambulizi ya mchwa katika hatua mbalimbali yanaweza kusababisha uharibifu mkubwa wa kiuchumi kwa mazao mbalimbali, aina za miti na vifaa vya ujenzi.Mchwa pia wanaweza kusababisha matatizo ya afya ya binadamu19.
Suala la upinzani kutoka kwa microorganisms na wadudu katika mashamba ya leo ya dawa na kilimo ni ngumu20,21.Kwa hivyo, kampuni zote mbili zinapaswa kutafuta dawa mpya za gharama nafuu na dawa salama za kuua wadudu.Viuatilifu vya syntetisk sasa vinapatikana na vimeonyeshwa kuwa vinaambukiza na kufukuza wadudu wenye manufaa wasiolengwa22.Katika miaka ya hivi karibuni, utafiti juu ya viasufaufa umepanuka kutokana na matumizi yao katika tasnia mbalimbali.Biosurfactants ni muhimu sana na muhimu katika kilimo, kurekebisha udongo, uchimbaji wa petroli, bakteria na uondoaji wa wadudu, na usindikaji wa chakula23,24.Viasuasuaji au viambata vya vijiumbe ni kemikali zinazotokana na bioasufati zinazozalishwa na vijidudu kama vile bakteria, chachu na kuvu katika makazi ya pwani na maeneo yaliyochafuliwa na mafuta25,26.Viatilifu vinavyotokana na kemikali na viasufaufa ni aina mbili ambazo hupatikana moja kwa moja kutoka kwa mazingira asilia27.Biosurfactants mbalimbali hupatikana kutoka kwa makazi ya baharini28,29.Kwa hiyo, wanasayansi wanatafuta teknolojia mpya kwa ajili ya uzalishaji wa biosurfactants kulingana na bakteria ya asili30,31.Maendeleo katika utafiti kama huo yanaonyesha umuhimu wa misombo hii ya kibiolojia kwa ulinzi wa mazingira32.Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium na genera hizi za bakteria ni wawakilishi waliojifunza vizuri23,33.
Kuna aina nyingi za biosurfactants zilizo na anuwai ya matumizi34.Faida kubwa ya misombo hii ni kwamba baadhi yao wana shughuli za antibacterial, larvicidal na wadudu.Hii ina maana kwamba zinaweza kutumika katika sekta ya kilimo, kemikali, dawa na vipodozi35,36,37,38.Kwa sababu viasufa kwa ujumla vinaweza kuoza na kunufaisha kimazingira, hutumika katika programu jumuishi za kudhibiti wadudu ili kulinda mazao39.Kwa hivyo, ujuzi wa msingi umepatikana kuhusu shughuli ya larvicidal na antitermite ya biosurfactants microbial zinazozalishwa na Enterobacter cloacae SJ2.Tulichunguza mabadiliko ya vifo na histolojia tulipokutana na viwango tofauti vya viasufaufa vya rhamnolipid.Zaidi ya hayo, tulitathmini programu ya kompyuta ya Quantitative Structure-Activity (QSAR) inayotumiwa sana na Ecological Structure-Activity (ECOSAR) ili kubaini sumu kali ya mwani, daphnia na samaki.
Katika utafiti huu, shughuli ya antitermite (sumu) ya biosurfactants iliyosafishwa katika viwango mbalimbali kuanzia 30 hadi 50 mg/ml (katika vipindi vya 5 mg/ml) ilijaribiwa dhidi ya mchwa wa Kihindi, O. obesus na aina ya nne )Tathmini.Mabuu ya instar Cx.Mabuu ya mbu quinquefasciatus.Viwango vya biosurfactant LC50 kwa zaidi ya saa 48 dhidi ya O. obesus na Cx.C. solanacearum.Viluwiluwi vya mbu vilitambuliwa kwa kutumia njia isiyo ya mstari ya kuweka curve.Matokeo yalionyesha kuwa vifo vya mchwa viliongezeka kwa kuongezeka kwa mkusanyiko wa biosurfactant.Matokeo yalionyesha kuwa biosurfactant ilikuwa na shughuli ya kuua wadudu (Mchoro 1) na shughuli ya kupambana na mchwa (Mchoro 2), yenye thamani ya LC50 ya saa 48 (95% CI) ya 26.49 mg/L (25.40 hadi 27.57) na 33.43 mg/ l (Mchoro 31.09 hadi 35.68), kwa mtiririko huo (Jedwali 1).Kwa upande wa sumu kali (masaa 48), biosurfactant imeainishwa kama "yenye madhara" kwa viumbe vilivyojaribiwa.Kinyunyuziaji kilichotengenezwa katika utafiti huu kilionyesha shughuli bora ya kuua lavi na vifo vya 100% ndani ya masaa 24-48 baada ya kufichuliwa.
Hesabu thamani ya LC50 kwa shughuli ya kuua viluwiluwi.Uwekaji wa curve isiyo ya mstari (mstari thabiti) na muda wa 95% wa kujiamini (eneo lenye kivuli) kwa vifo vya jamaa (%).
Kokotoa thamani ya LC50 kwa shughuli ya kupambana na mchwa.Uwekaji wa curve isiyo ya mstari (mstari thabiti) na muda wa 95% wa kujiamini (eneo lenye kivuli) kwa vifo vya jamaa (%).
Mwishoni mwa jaribio, mabadiliko ya kimofolojia na makosa yalizingatiwa chini ya darubini.Mabadiliko ya kimofolojia yalizingatiwa katika vikundi vya udhibiti na kutibiwa kwa ukuzaji wa 40x.Kama inavyoonyeshwa katika Mchoro wa 3, kuharibika kwa ukuaji kulitokea kwa mabuu mengi yaliyotibiwa na viasufa.Kielelezo 3a kinaonyesha Cx ya kawaida.quinquefasciatus, Kielelezo 3b kinaonyesha Cx isiyo ya kawaida.Husababisha mabuu tano ya nematode.
Madhara ya vipimo vya sublethal (LC50) vya viasufaktati kwenye ukuzaji wa mabuu ya Culex quinquefasciatus.Picha ya hadubini nyepesi (a) ya Cx ya kawaida katika ukuzaji wa 40×.quinquefasciatus (b) Cx isiyo ya kawaida.Husababisha mabuu tano ya nematode.
Katika utafiti wa sasa, uchunguzi wa histological wa mabuu yaliyotibiwa (Mchoro 4) na mchwa (Mchoro 5) ulifunua makosa kadhaa, ikiwa ni pamoja na kupunguzwa kwa eneo la tumbo na uharibifu wa misuli, tabaka za epithelial na ngozi.katikati.Histolojia ilifunua utaratibu wa shughuli ya kizuizi cha biosurfactant iliyotumiwa katika utafiti huu.
Histopatholojia ya mabuu ya Cx ya kawaida ambayo hayajatibiwa.quinquefasciatus larvae (udhibiti: (a,b)) na kutibiwa na biosurfactant (matibabu: (c,d)).Mishale inaonyesha epithelium ya matumbo iliyotibiwa (epi), viini (n), na misuli (mu).Upau = 50 µm.
Histopatholojia ya O. obesus ya kawaida ambayo haijatibiwa (udhibiti: (a,b)) na kutibiwa kwa kutumia biosurfactant (matibabu: (c,d)).Mishale inaonyesha epithelium ya matumbo (epi) na misuli (mu), kwa mtiririko huo.Upau = 50 µm.
Katika utafiti huu, ECOSAR ilitumiwa kutabiri sumu kali ya bidhaa za biosurfactant ya rhamnolipid kwa wazalishaji wa msingi (mwani wa kijani), watumiaji wa msingi (viroboto vya maji) na watumiaji wa pili (samaki).Mpango huu hutumia miundo ya kiasi cha kisasa cha shughuli za kiasi ili kutathmini sumu kulingana na muundo wa molekuli.Muundo huu hutumia programu ya shughuli za muundo (SAR) kukokotoa sumu kali na ya muda mrefu ya dutu kwa viumbe vya majini.Hasa, Jedwali la 2 linatoa muhtasari wa makadirio ya viwango vya wastani vya kuua (LC50) na viwango vya wastani vya ufanisi (EC50) kwa spishi kadhaa.Sumu inayoshukiwa iliainishwa katika viwango vinne kwa kutumia Mfumo wa Uainishaji na Uwekaji Lebo za Kemikali Ulimwenguni (Jedwali la 3).
Udhibiti wa magonjwa yanayoenezwa na wadudu, hasa aina za mbu na mbu aina ya Aedes.Wamisri, sasa kazi ngumu 40,41,42,43,44,45,46.Ingawa baadhi ya viuatilifu vinavyopatikana kwa kemikali, kama vile pyrethroids na organophosphates, vina manufaa kwa kiasi fulani, vinahatarisha sana afya ya binadamu, ikiwa ni pamoja na kisukari, matatizo ya uzazi, matatizo ya neva, saratani, na magonjwa ya kupumua.Zaidi ya hayo, baada ya muda, wadudu hawa wanaweza kuwa sugu kwao13,43,48.Kwa hivyo, hatua za udhibiti wa kibiolojia zenye ufanisi na rafiki wa mazingira zitakuwa njia maarufu zaidi ya kudhibiti mbu49,50.Benelli51 alipendekeza kuwa udhibiti wa mapema wa vienezaji vya mbu ungekuwa na ufanisi zaidi katika maeneo ya mijini, lakini hawakupendekeza matumizi ya dawa za kuua mbu katika maeneo ya vijijini52.Tom et al 53 pia alipendekeza kuwa kudhibiti mbu katika hatua zao za ukomavu itakuwa mkakati salama na rahisi kwa sababu ni nyeti zaidi kwa mawakala wa kudhibiti 54 .
Uzalishaji wa biosurfactant kwa aina kali (Enterobacter cloacae SJ2) ulionyesha ufanisi thabiti na wa kuahidi.Utafiti wetu wa awali uliripoti kuwa Enterobacter cloacae SJ2 inaboresha uzalishaji wa biosurfactant kwa kutumia vigezo vya physicochemical26.Kulingana na utafiti wao, hali bora zaidi za uzalishaji wa biosurfactant kwa kitenganishi kinachowezekana cha E. cloacae ilikuwa incubation kwa saa 36, fadhaa saa 150 rpm, pH 7.5, 37 °C, chumvi 1 ppt, 2% glucose kama chanzo cha kaboni, 1% chachu. .dondoo ilitumika kama chanzo cha nitrojeni kupata 2.61 g/L biosurfactant.Aidha, viasufa vilikuwa na sifa za kutumia TLC, FTIR na MALDI-TOF-MS.Hii ilithibitisha kuwa rhamnolipid ni biosurfactant.Dawa za biosurfactants za Glycolipid ni darasa lililosomwa kwa kina zaidi kati ya aina zingine za biosurfactants55.Zinajumuisha sehemu za kabohaidreti na lipid, haswa minyororo ya asidi ya mafuta.Miongoni mwa glycolipids, wawakilishi wakuu ni rhamnolipid na sophorolipid56.Rhamnolipids huwa na sehemu mbili za rhamnose zinazounganishwa na asidi ya mono- au di-β-hydroxydecanoic 57.Matumizi ya rhamnolipids katika tasnia ya matibabu na dawa yamethibitishwa vyema 58 , pamoja na matumizi yao ya hivi majuzi kama viuatilifu 59 .
Kuingiliana kwa biosurfactant na eneo la hydrophobic ya siphon ya kupumua inaruhusu maji kupita kwenye cavity yake ya tumbo, na hivyo kuongeza mawasiliano ya mabuu na mazingira ya majini.Uwepo wa biosurfactants pia huathiri trachea, urefu ambao ni karibu na uso, ambayo inafanya iwe rahisi kwa mabuu kutambaa juu ya uso na kupumua.Matokeo yake, mvutano wa uso wa maji hupungua.Kwa kuwa mabuu hayawezi kushikamana na uso wa maji, huanguka chini ya tank, kuharibu shinikizo la hydrostatic, na kusababisha matumizi makubwa ya nishati na kifo kwa kuzama38,60.Matokeo sawia yalipatikana na Ghribi61, ambapo kiasufafakta cha kibayolojia kilichotolewa na Bacillus subtilis kilionyesha shughuli ya kuua viluwiluwi dhidi ya Ephestia kuehniella.Vile vile, shughuli ya larvicidal ya Cx.Das na Mukherjee23 pia walitathmini athari za lipopeptidi za mzunguko kwenye mabuu ya quinquefasciatus.
Matokeo ya utafiti huu yanahusu shughuli ya kuua larvicidal ya biosurfactants ya rhamnolipid dhidi ya Cx.Mauaji ya mbu wa quinquefasciatus ni sawa na matokeo yaliyochapishwa hapo awali.Kwa mfano, biosurfactants zinazotokana na surfactin zinazozalishwa na bakteria mbalimbali za jenasi Bacillus hutumiwa.na Pseudomonas spp.Baadhi ya ripoti za mapema64,65,66 ziliripoti shughuli ya kuua mabuu ya viuatilifu vya lipopeptide kutoka kwa Bacillus subtilis23.Deepali na wengine.63 iligundua kuwa rhamnolipid biosurfactant iliyotengwa na Stenotropomonas maltophilia ilikuwa na shughuli kubwa ya kuua viluwiluwi katika mkusanyiko wa 10 mg/L.Silva na wengine.67 iliripoti shughuli ya kuua larvicidal ya rhamnolipid biosurfactant dhidi ya Ae katika mkusanyiko wa 1 g/L.Aedes Misri.Kanakdande et al.68 iliripoti kwamba viasufa vya biopeptidi vinavyozalishwa na Bacillus subtilis vilisababisha vifo vya jumla katika mabuu ya Culex na mchwa wenye sehemu ya lipophilic ya Eucalyptus.Vile vile, Masendra et al.69 walioripotiwa kuwa mchwa (Cryptotermes cynocephalus Light.) vifo vya 61.7% katika sehemu za lipophilic n -hexane na EtOAc za dondoo ghafi ya E..
Parthipan et al 70 waliripoti matumizi ya dawa ya kuua wadudu ya lipopeptide biosurfactants zinazozalishwa na Bacillus subtilis A1 na Pseudomonas stutzeri NA3 dhidi ya Anopheles Stephensi, vekta ya vimelea vya malaria Plasmodium.Waliona kwamba mabuu na pupa waliishi kwa muda mrefu zaidi, walikuwa na vipindi vifupi vya oviposition, walikuwa tasa, na walikuwa na muda mfupi wa kuishi walipotibiwa na viwango tofauti vya biosurfactants.Thamani za LC50 za B. subtilis biosurfactant A1 zilikuwa 3.58, 4.92, 5.37, 7.10 na 7.99 mg/L kwa hali tofauti za mabuu (yaani mabuu I, II, III, IV na pupae ya hatua) mtawalia.Kwa kulinganisha, biosurfactants kwa hatua ya larval I-IV na hatua ya pupa ya Pseudomonas stutzeri NA3 walikuwa 2.61, 3.68, 4.48, 5.55 na 6.99 mg/L, mtawalia.Fenolojia iliyocheleweshwa ya mabuu na pupa waliosalia inadhaniwa kuwa ni matokeo ya usumbufu mkubwa wa kisaikolojia na kimetaboliki unaosababishwa na matibabu ya viua wadudu71.
Wickerhamomyces anomalus aina CCMA 0358 inazalisha biosurfactant na 100% shughuli ya kuua viluwiluwi dhidi ya mbu Aedes.aegypti muda wa saa 24 38 ulikuwa wa juu kuliko ilivyoripotiwa na Silva et al.Kinyunyuziaji kinachotengenezwa kutoka kwa Pseudomonas aeruginosa kwa kutumia mafuta ya alizeti kama chanzo cha kaboni kimethibitishwa kuua 100% ya mabuu ndani ya saa 48 67 .Abinaya et al.72 na Pradhan et al.73 pia walionyesha athari za kuua viluwiluwi au kuua wadudu zinazotolewa na watenganishaji kadhaa wa jenasi Bacillus.Utafiti uliochapishwa hapo awali na Senthil-Nathan et al.iligundua kuwa 100% ya viluwiluwi wa mbu waliowekwa kwenye lago za mimea walikuwa na uwezekano wa kufa.74.
Kutathmini madhara madogo ya viua wadudu kwenye biolojia ya wadudu ni muhimu kwa programu jumuishi za udhibiti wa wadudu kwa sababu dozi ndogo/mikusanyiko haiui wadudu lakini inaweza kupunguza idadi ya wadudu katika vizazi vijavyo kwa kuvuruga sifa za kibiolojia10.Siqueira et al 75 aliona shughuli kamili ya larvicidal (100% ya vifo) ya rhamnolipid biosurfactant (300 mg/ml) ilipojaribiwa kwa viwango mbalimbali kuanzia 50 hadi 300 mg/ml.Hatua ya mabuu ya aina ya Aedes aegypti.Walichanganua athari za muda hadi kifo na viwango vya chini juu ya maisha ya mabuu na shughuli za kuogelea.Kwa kuongezea, waliona kupungua kwa kasi ya kuogelea baada ya masaa 24-48 ya kufichuliwa na viwango vya chini vya biosurfactant (kwa mfano, 50 mg/mL na 100 mg/mL).Sumu ambazo zina majukumu madogo ya kuahidi hufikiriwa kuwa na ufanisi zaidi katika kusababisha uharibifu mwingi kwa wadudu walio wazi76.
Uchunguzi wa kihistoria wa matokeo yetu unaonyesha kwamba biosurfactants zinazozalishwa na Enterobacter cloacae SJ2 hubadilisha kwa kiasi kikubwa tishu za mbu (Cx. quinquefasciatus) na mabuu ya mchwa (O. obesus).Makosa kama hayo yalisababishwa na utayarishaji wa mafuta ya basil huko An.gambiaes.s na An.arabica zilielezewa na Ochola77.Kamaraj et al.78 pia walielezea makosa sawa ya kimofolojia katika An.Mabuu ya Stephanie yaliwekwa wazi kwa nanoparticles za dhahabu.Vasantha-Srinivasan et al.79 pia waliripoti kuwa mafuta muhimu ya mfuko wa mchungaji yaliharibu sana chumba na tabaka za epithelial za Aedes albopictus.Aedes Misri.Raghavendran et al aliripoti kwamba mabuu ya mbu yalitibiwa kwa 500 mg/ml dondoo ya mycelial ya kuvu ya ndani ya Penicillium.Ae kuonyesha uharibifu mkubwa wa histolojia.Misri na Cx.Kiwango cha vifo 80. Hapo awali, Abinaya et al.Mabuu ya nyota ya nne ya An walichunguzwa.Stephensi na Ae.aegypti ilipata mabadiliko mengi ya histolojia katika Aedes aegypti iliyotibiwa na B. licheniformis exopolysaccharides, ikiwa ni pamoja na cecum ya tumbo, kudhoofika kwa misuli, uharibifu na kuharibika kwa kamba ya neva72.Kulingana na Raghavendran et al., baada ya matibabu na P. daleae mycelial extract, seli za midgut za mbu zilizojaribiwa (4th instar larvae) zilionyesha uvimbe wa lumen ya matumbo, kupungua kwa yaliyomo kati ya seli, na kuzorota kwa nyuklia81.Mabadiliko sawa ya kihistoria yalizingatiwa katika mabuu ya mbu yaliyotibiwa na dondoo la jani la echinacea, ikionyesha uwezo wa kuua wadudu wa misombo iliyotibiwa50.
Matumizi ya programu ya ECOSAR yamepata utambuzi wa kimataifa82.Utafiti wa sasa unapendekeza kwamba sumu kali ya viasufa-hai vya ECOSAR kwa mwani mdogo (C. vulgaris), viroboto wa samaki na maji (D. magna) iko ndani ya aina ya "sumu" iliyofafanuliwa na Umoja wa Mataifa83.Muundo wa sumu ya ikolojia wa ECOSAR hutumia SAR na QSAR kutabiri sumu kali na ya muda mrefu ya dutu na mara nyingi hutumiwa kutabiri sumu ya vichafuzi vya kikaboni82,84.
Paraformaldehyde, sodiamu fosfati bafa (pH 7.4) na kemikali nyingine zote zilizotumika katika utafiti huu zilinunuliwa kutoka Maabara ya HiMedia, India.
Uzalishaji wa biosurfactant ulifanywa katika chupa za mililita 500 za Erlenmeyer zenye mililita 200 za kati ya Bushnell Haas tasa iliyoongezwa 1% ya mafuta ghafi kama chanzo pekee cha kaboni.Kilimo cha Enterobacter cloacae SJ2 (1.4 × 104 CFU/ml) kilichanjwa na kupandwa kwenye shaker ya orbital ifikapo 37°C, 200 rpm kwa siku 7.Baada ya kipindi cha incubation, biosurfactant ilitolewa kwa kuweka katikati utamaduni katika 3400×g kwa dakika 20 katika 4°C na kusababisha supernatant kutumika kwa madhumuni ya uchunguzi.Taratibu za uboreshaji na sifa za viasufa vimepitishwa kutoka kwa utafiti wetu wa awali26.
Mabuu ya Culex quinquefasciatus yalipatikana kutoka kwa Kituo cha Utafiti wa Hali ya Juu katika Biolojia ya Baharini (CAS), Palanchipetai, Tamil Nadu (India).Mabuu yalikuzwa katika vyombo vya plastiki vilivyojazwa na maji yaliyotolewa kwa joto la 27 ± 2°C na muda wa kupiga picha wa 12:12 (mwanga: giza).Vibuu vya mbu walilishwa suluhisho la 10% la glukosi.
Mabuu ya Culex quinquefasciatus yamepatikana kwenye mizinga ya maji wazi na isiyolindwa.Tumia miongozo ya uainishaji sanifu ili kutambua na kutunza mabuu kwenye maabara85.Majaribio ya kuua larvicidal yalifanyika kwa mujibu wa mapendekezo ya Shirika la Afya Duniani 86 .SH.Mabuu ya instar ya nne ya quinquefasciatus yalikusanywa katika zilizopo zilizofungwa katika vikundi vya 25 ml na 50 ml na pengo la hewa la theluthi mbili ya uwezo wao.Biosurfactant (0-50 mg/ml) iliongezwa kwa kila bomba kibinafsi na kuhifadhiwa kwa 25 °C.Bomba la kudhibiti lilitumia maji ya distilled tu (50 ml).Mabuu waliokufa walizingatiwa kuwa wale ambao hawakuonyesha dalili za kuogelea wakati wa incubation (saa 12-48) 87 .Kokotoa asilimia ya vifo vya mabuu kwa kutumia mlinganyo.(1)88.
Familia ya Odontotermitidae inajumuisha mchwa wa Kihindi Odontotermes obesus, anayepatikana kwenye magogo yanayooza katika Kampasi ya Kilimo (Chuo Kikuu cha Annamalai, India).Jaribu biosurfactant hii (0–50 mg/ml) kwa kutumia taratibu za kawaida ili kubaini kama ina madhara.Baada ya kukausha kwa mtiririko wa hewa ya laminar kwa dakika 30, kila kipande cha karatasi ya Whatman kiliwekwa na biosurfactant katika mkusanyiko wa 30, 40, au 50 mg/ml.Vipande vya karatasi vilivyopakwa awali na visivyofunikwa vilijaribiwa na kulinganishwa katikati ya sahani ya Petri.Kila sahani ya petri ina takriban mchwa thelathini hai O. obesus.Kudhibiti na mchwa mtihani walipewa karatasi mvua kama chanzo cha chakula.Sahani zote ziliwekwa kwenye joto la kawaida wakati wote wa incubation.Mchwa alikufa baada ya 12, 24, 36 na 48 masaa89,90.Equation 1 ilitumiwa kukadiria asilimia ya vifo vya mchwa katika viwango tofauti vya biosurfactant.(2).
Sampuli ziliwekwa kwenye barafu na kupakiwa katika vijidudu vyenye 100 ml ya 0.1 M sodiamu fosfati bafa (pH 7.4) na kutumwa kwa Maabara kuu ya Patholojia ya Kilimo cha Majini (CAPL) cha Kituo cha Rajiv Gandhi cha Kilimo cha Majini (RGCA).Histology Laboratory, Sirkali, Mayiladuthurai.Wilaya, Tamil Nadu, India kwa uchambuzi zaidi.Sampuli ziliwekwa mara moja katika paraformaldehyde 4% kwa 37 ° C kwa masaa 48.
Baada ya awamu ya urekebishaji, nyenzo hiyo ilioshwa mara tatu na bafa ya fosforasi ya sodiamu ya 0.1 M (pH 7.4), ikatolewa hatua kwa hatua katika ethanoli na kulowekwa kwenye resini ya LEICA kwa siku 7.Kisha dutu hii huwekwa kwenye ukungu wa plastiki uliojaa resini na polima, na kisha kuwekwa katika tanuri iliyowaka moto hadi 37°C hadi kizuizi chenye dutu hii kipolimishwe kabisa.
Baada ya upolimishaji, vitalu vilikatwa kwa kutumia microtome ya LEICA RM2235 (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, USA) hadi unene wa 3 mm.Sehemu zimepangwa kwenye slaidi, na sehemu sita kwa kila slaidi.Slaidi zimekaushwa kwa joto la kawaida, kisha zimetiwa rangi na hematoxylin kwa dakika 7 na kuosha na maji ya bomba kwa dakika 4.Kwa kuongeza, tumia suluhisho la eosin kwenye ngozi kwa dakika 5 na suuza na maji ya bomba kwa dakika 5.
Sumu kali ilitabiriwa kwa kutumia viumbe vya majini kutoka viwango tofauti vya tropiki: samaki wa saa 96 LC50, saa 48 D. magna LC50, na mwani wa kijani wa saa 96 EC50.Sumu ya viasuasuaji wa rhamnolipid kwa samaki na mwani wa kijani ilitathminiwa kwa kutumia programu ya ECOSAR toleo la 2.2 kwa Windows iliyotengenezwa na Wakala wa Ulinzi wa Mazingira wa Marekani.(Inapatikana mtandaoni katika https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Vipimo vyote vya shughuli ya larvicidal na antitermite vilifanywa kwa mara tatu.Urejeshaji usio wa mstari (logi ya vigeu vya majibu ya kipimo) ya data ya vifo vya mabuu na mchwa ulifanyika ili kukokotoa ukolezi wa wastani wa mauti (LC50) na muda wa kujiamini wa 95%, na mikondo ya mwitikio wa mkusanyiko ilitolewa kwa kutumia Prism® (toleo la 8.0, GraphPad Software) Inc. Marekani) 84, 91.
Utafiti wa sasa unaonyesha uwezo wa viuasusuaji wa viumbe vidogo vinavyozalishwa na Enterobacter cloacae SJ2 kama mawakala wa kuua mbu na viua mchwa, na kazi hii itachangia uelewa mzuri wa taratibu za hatua ya kuua larvicidal na antitermite.Masomo ya histolojia ya mabuu yaliyotibiwa na viuasufa vilionyesha uharibifu wa njia ya usagaji chakula, midgut, gamba la ubongo na haipaplasia ya seli za epithelial ya matumbo.Matokeo: Tathmini ya sumu ya shughuli ya antitermite na larvicidal ya rhamnolipid biosurfactant inayozalishwa na Enterobacter cloacae SJ2 ilifunua kuwa pekee hii ni dawa ya biopesti inayowezekana kwa udhibiti wa magonjwa ya mbu yanayoenezwa na vekta (Cx quinquefasciatus) na mchwa (O. obesus).Kuna haja ya kuelewa sumu ya msingi ya mazingira ya biosurfactants na athari zao za mazingira.Utafiti huu unatoa msingi wa kisayansi wa kutathmini hatari ya mazingira ya biosurfactants.
Muda wa kutuma: Apr-09-2024